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TeSP - Análises Laboratoriais

Análises Bioquímicas

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Publicação em Diário da República: Despacho nº 7835/2019 de 05/09/2019

6 ECTS; 2º Ano, 1º Semestre, 45,0 PL + 15,0 TP

Docente(s)
- David Miguel Martins Sousa

Pré-requisitos
Não aplicável

Objetivos
No final da UC espera-se que o aluno detenha conhecimentos téoricos sobre: - a estrutura e organização dos diferentes tipos de células; - a função e estrutura das biomoléculas mais importantes, nomeadamente os ácidos nucleicos (DNA e RNA), glícidos, lípidos e proteínas; - tenham noções de cinética enzimática e de ensaios enzimáticos.

O aluno deve ainda saber aplicar em contexto laboratorial: -a preparação de soluções tampão típicas de ensaios bioquímicos, -técnicas de doseamento de biomoléculas (glícidos, proteínas, ácidos nucleicos); -métodos colorimétricos e análises espetrofotométricas; -técnicas analíticas para a separação de proteínas (eletroforeses em gel de acrilamida); -métodos de análise e doseamento com base em ensaios enzimáticos diretos e indiretos

Programa
PROGRAMA TEÓRICO
1. Métodos quantitativos em bioquímica
1.1 Determinação de fosfato;
1.2 Determinação de monossacarídeos;
1.3 Determinação de proteínas;
1.4 Determinação de ácidos nucleicos.

2. Instrumentação e técnicas
2.1 Centrifugação
2.2 Eletroforese
2.3 Técnicas Imunológicas;

3. Metodologias de análises de genes e seus produtos
3.1 Eletroforese de DNA em gel de agarose;
3.2 Mapa de restrição
3.3 Southern, Nothern e Western blot
3.4 Imunoprecipitação

4. Reações em cadeia da Polimerase(PCR)
4.1 Técnica
4.2 Particularidades e aplicações
4.3 PCR quantitativa

Programa prático
TP1-Determinação de açúcares redutores;
TP2- Determinação fósforo total de uma amostra de água;
TP3- Produção de cerveja e determinação da atividade enzimática da S. Cerevisiae;
TP4- Separação de biomassa celular por centrifugação;
TP5- Preparação de tampões e soluções para biologia molecular;
TP6- Extração, purificação, concentração e quantificação de DNA bacteriano;
TP7- Separação eletroforética de fragmentos de DNA em gel de agarose.

Metodologia de avaliação
A- Três mini-testes(peso 10% cada). Não é imposta nota mínima para cada teste, isoladamente, mas a sua média ponderada deve ser superior a 9,5 valores.

B- Contexto de sala de aula e caderno de laboratório 10%; Relatório 1 da TP3 30%

- Poster da TP 6 e TP7 30%

CF - A classificação final será calculada da seguinte forma:
CF= A+B

Bibliografia
- Azevedo, I. e Alçada, M. (2002). Práticas de Bioquímica para as Ciências da Saúde. Lisboa: Lidel Edições Técnicas
- Berg, J. e Tymoczko, J. (2006). Biochemistry. Reino Unido: W. H. Freeman and Compan
- Holtzhauer, M. (2006). Basic Methods for the Biochemical Lab. EUA: Springer

Método de Ensino
Teórica: recorre-se a uma metodologia expositiva-participativa privilegiando-se a participação dos estudantes.
Prática laboratorial: desenvolvem-se trabalhos experimentais que abrangem os conteúdos da UC promovendo competências no "saber-fazer".

Software utilizado nas aulas
Não aplicável

 

Aprovado em Conselho Técnico Cientifico: 25 de novembro de 2022

Download da Ficha da Unidade Curricular (FUC)

 

 


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